人成骨細胞永生化

成骨細胞是骨發(fā)生和骨形成的重要細胞,具有合成、分泌組成骨基質(zhì)的膠原和糖蛋白的作用,并通過鈣化基質(zhì)形成骨組織。另外,成骨細胞在維持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,生理機制調(diào)節(jié)和骨代謝性疾病中亦發(fā)揮重要作用。
1) 組織來源于正常人關(guān)節(jié)骨組織。
2) 細胞鑒定:堿性磷酸酶(ALP)化學染色。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式:長梭狀,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。

英文名稱 | 人成骨細胞永生化 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁培養(yǎng) |
細胞形態(tài) | 長梭狀,不規(guī)則細胞, | 貨號 | E-XB6558 |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 貨期 | 現(xiàn)貨 |

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9. 注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。


1)復蘇細胞:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

大鼠骨外膜細胞 | GC-1 spg小鼠精原系細胞專用培養(yǎng)基 |
兔表皮干細胞 | HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細胞專用培養(yǎng)基 |
兔皮下微血管內(nèi)皮細胞 | L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細胞專用培養(yǎng)基 |
兔脂肪細胞 | MFC小鼠前胃癌細胞專用培養(yǎng)基 |
兔前脂肪細胞 | NIH/3T3小鼠胚胎細胞專用培養(yǎng)基 |
兔脂肪微血管內(nèi)皮細胞 | RAW 264.7小鼠單核巨噬白血病細胞專用培養(yǎng)基 |
兔真皮毛乳頭細胞 | SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞專用培養(yǎng)基 |
兔中耳上皮細胞 | AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細胞專用培養(yǎng)基 |
兔肌腱干細胞 | H4-II-E-C3大鼠肝癌細胞專用培養(yǎng)基 |
兔骨髓間充質(zhì)干細胞 | PC12低分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 低分化 細胞專用培養(yǎng)基 |
兔脂肪干細胞 | Walker/LLC-WRC 256大鼠腹水癌細胞專用培養(yǎng)基 |
兔滑膜間充質(zhì)干細胞 | 3D4/21豬肺泡巨噬細胞專用培養(yǎng)基 |
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兔膈肌細胞 | OAR-L1綿羊肺成纖維(原代永生化)細胞專用培養(yǎng)基 |
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