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產品展示   Products細胞系>>小鼠細胞系>>E14小鼠胚胎干細胞
 
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產品名稱:
E14小鼠胚胎干細胞
產品型號:
產品報價:
600
產品特點:
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  E14小鼠胚胎干細胞的詳細資料:

E14小鼠胚胎干細胞

E14小鼠胚胎干細胞

英文名稱

E14

規(guī)格

1×106cells

種屬

小鼠

生長特性


細胞形態(tài)


貨號

E-XB6725

用途

僅供科研研究實驗

貨期

現(xiàn)貨

E14小鼠胚胎干細胞

細胞數(shù)量:1*10^6

細胞運輸:干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)

培養(yǎng)基: 準備DMEM 基礎培養(yǎng)基 81%培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,15%;GlutaMAX-1谷an酰胺,1 %;MEM NEAA非必需氨基酸,1%;Sodium Pyruvate丙酮酸鈉,1%;P/S青霉su-鏈霉su,1%;β-巰基乙醇,0.5 mL(1000X);LIF ,5μg(10ng/mL)。使用昆明白MEF作為飼養(yǎng)層細胞。

培養(yǎng)條件:培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。細胞凍存:液氮凍存(培養(yǎng)液 60%%,F(xiàn)BS 30%%,DMSO 10%,現(xiàn)用現(xiàn)配)

E14小鼠胚胎干細胞

E14小鼠胚胎干細胞

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9. 注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。


E14小鼠胚胎干細胞

E14小鼠胚胎干細胞

1)復蘇細胞:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

E14小鼠胚胎干細胞


小鼠下腔靜脈內皮細胞

MFC/LUC小鼠前胃癌細胞

SW948人結腸腺癌細胞

RGC5小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞株

TE-1人食管癌細胞

266-6小鼠胰腺腺泡癌細胞

TE-12人食管癌細胞

COR-L88小細胞肺癌

SW579人甲狀腺癌細胞

NCI-H1836小細胞肺癌

SW620人結直腸腺癌細胞

NCI-H847 [H847]小細胞肺癌

SW620+luc人結直腸腺癌細胞+luc

KP4-2胰腺癌

TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌細胞株

Panc 08.13胰腺導管腺癌

TT人甲狀腺癌細胞

NCI-H23-Luc熒光素酶標記的人非小細胞

SW780人膀胱移行細胞癌

HCC1806-Luc熒光素酶標記的人乳腺鱗狀癌細胞

T2 (174xcem.T2 )人淋巴母細胞

AChEAE-1-Luc熒光素酶標記的小鼠雜交瘤細胞

T24人膀胱移行細胞癌細胞

Caco-2直腸癌

T47D人乳腺導管癌細胞

E14小鼠胚胎干細胞CHO-GS中國倉鼠卵巢細胞

T98G 人膠質母細胞瘤

SKG-IIIazi宮癌

TCCSUP人膀胱癌細胞

MC53小鼠腎系膜細胞

 


產品相關關鍵字: E14 小鼠胚胎干細胞
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